Staff View: Análise proteômica comparativa da saliva entre diferentes períodos após a alimentação sanguínea de Triatoma dimidiata, triatomíneo vetor da doença de Chagas

Análise proteômica comparativa da saliva entre diferentes períodos após a alimentação sanguínea de Triatoma dimidiata, triatomíneo vetor da doença de Chagas

Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2016.

Main Author:	Praça, Yanna Reis
Other Authors:	Araujo, Carla Nunes de
Format:	Dissertação
Language:	Português
Published:	2016
Subjects:	Chagas, Doença de Triatoma Análise proteômica Triatoma - saliva
Online Access:	http://repositorio.unb.br/handle/10482/21448 http://dx.doi.org/10.26512/2016.07.D.21448
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id	ir-10482-21448
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spelling	ir-10482-214482021-09-28T13:37:09Z Análise proteômica comparativa da saliva entre diferentes períodos após a alimentação sanguínea de Triatoma dimidiata, triatomíneo vetor da doença de Chagas Praça, Yanna Reis Araujo, Carla Nunes de Chagas, Doença de Triatoma Análise proteômica Triatoma - saliva Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2016. Os triatomíneos são artrópodes hematófagos durante todo o seu ciclo de vida e para garantir o sucesso de seu repasto, desenvolveram estratégias adaptativas que contrapõem o sistema hemostático e imune do hospedeiro, injetando moléculas farmacologicamente ativas durante esse processo. Por possuirem diversas moléculas com interesse farmacológico, a saliva desses artrópodes hematófagos passou a ser alvo de pesquisas. Para ampliar o conhecimento sobre essas moléculas, esse trabalho teve como objetivos: 1) investigar a expressão protéica na saliva de Triatoma dimidiata em diferentes tempos após a alimentação sanguínea, por meio da análise proteômica comparativa por LC-MS/MS, eletroforese bidimensional e análises in silico, e 2) caracterizar in silico a sequência aminoacídica do antígeno 5 salivar de Rhodnius neglectus (RNAV), além da expressão dessa molécula em Escherichia coli. A análise proteômica comparativa da saliva de T. dimidiata levou à identificação de 362 proteínas, das quais 65 eram específicas da amostra de cinco dias após a alimentação sanguínea (dpa) e 79 específicas da amostra de 10 dpa, além de contribuir para validar dados do transcritoma dessa espécie disponível na literatura. A análise in silico do RNAV sugere que a molécula é secretada pela via clássica, que modificações pós-traducionais como fosforilação e glicosilação devem ocorrer na proteína, e que existem aproximadamente 25 resíduos de aminoácidos que podem estar presentes em epítopos lineares para células B. Não foi possível obter o RNAV recombinante. O conhecimento das proteínas salivares do T. dimidiata e sua comparação com as de outras espécies de artrópodes hematófagos pode ser útil para entender processos biológicos fundamentais como sobrevivência, adaptação e as interações desses vetores com seus hospedeiros e com os agentes infecciosos que eles são capazes de transmitir. Triatomine are bloodsucking arthropods throughout their life cycle and to ensure the success of their meal, they have developed adaptive strategies that counteract the hemostatic and immune system of the host, injecting pharmacologically active molecules during this process. By owning several molecules with pharmacological interest, bloodsucking arthropods saliva has become the subject of various research. To enhance our knowledge about these molecules, this study aimed 1) to investigate the protein expression in Triatoma dimidiata saliva at different times after the blood feeding through comparative proteomic analysis using LC-MS/MS, 2-DE electrophoresis and bioinformatics, and 2) to characterize in silico the salivary antigen 5 of Rhodnius neglectus (RNAV), beyond its expressin in Escherichia coli. The comparative proteomic analysis of T. dimidiata saliva revealed 362 proteins, 65 specific of the sample collected 5 days after feeding and 79 specific of the sample collected 10 days after feeding, and aided to validate available data from T. dimidiata transcriptome. RNAV in silico analysis revealed this protein may be secreted by the classical pathway, phosphorilation and glycosilation sites, and the existence of 25 amino acid residues that may be present in linear epitopes to B cells. Our attempt failed to produce recombinant RNAV. Knowing T. dimidiata salivary proteins and comparison with those from other species of hematophagous arthropods may help to understand fundamental biological processes such as survival, adaptation, vector-host and vector-pathogens interactions. 2016-09-20T18:44:27Z 2016-09-20T18:44:27Z 2016-09-20 2016-07-08 Dissertação PRAÇA, Yanna Reis. Análise proteômica comparativa da saliva entre diferentes períodos após a alimentação sanguínea de Triatoma dimidiata, triatomíneo vetor da doença de Chagas. 2016. [186] f., il. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) — Universidade de Brasília, Brasília, 2016. http://repositorio.unb.br/handle/10482/21448 http://dx.doi.org/10.26512/2016.07.D.21448 Português Acesso Aberto A concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade de Brasília e o IBICT a disponibilizar por meio dos sites www.bce.unb.br, www.ibict.br, http://hercules.vtls.com/cgi-bin/ndltd/chameleon?lng=pt&skin=ndltd sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, a partir desta data. application/pdf
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Análise proteômica comparativa da saliva entre diferentes períodos após a alimentação sanguínea de Triatoma dimidiata, triatomíneo vetor da doença de Chagas

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