Efeito da terapia fotodinâmica associada a zincoporfirinas sobre Leishmania braziliensis
A Leishmaniose é uma doença causada por protozoários do gênero Leishmania. A terapia atual enfrenta desafios relacionados à presença de efeitos colaterais e desenvolvimento de resistência. A terapia fotodinâmica (TFD) está emergindo como uma potencial modalidade terapêutica para Leishmaniose Cutânea...
| Main Author: | ANDRADE, Camila Galvão de |
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| Other Authors: | CARVALHO JÚNIOR, Luiz Bezerra de |
| Format: | doctoralThesis |
| Language: | por |
| Published: |
Universidade Federal de Pernambuco
2019
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| Subjects: | |
| Online Access: |
https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/32355 |
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| Summary: |
A Leishmaniose é uma doença causada por protozoários do gênero Leishmania. A terapia atual enfrenta desafios relacionados à presença de efeitos colaterais e desenvolvimento de resistência. A terapia fotodinâmica (TFD) está emergindo como uma potencial modalidade terapêutica para Leishmaniose Cutânea. Neste trabalho, foi avaliado o efeito fotodinâmico das Zn(II) meso-tetrakis(N-alquilpiridinio-2-il)porfirinas ZnTE-2-PyP⁴⁺ e ZnTnHex-2-PyP⁴⁺ sobre Leishmania braziliensis. Promastigotas foram incubadas com a ZnTE-2-PyP⁴⁺ (5 ou 10 μM) durante 10 min. As amostras foram irradiadas com LED (300 mW/cm2) por 5 ou 10 min. Um protocolo semelhante foi também utilizado para amastigotas. Os efeitos fototóxicos induzidos nas promastigotas foram analisados através da contagem celular em câmara de Neubauer, marcação com iodeto de propídio (IP) e rodamina 123 (Rh 123) por citometria de fluxo e microscopias eletrônicas de transmissão e varredura (MET e MEV). A citotoxicidade relacionada ao tratamento foi avaliada em células de mamíferos (células VERO, macrófagos J774 e células de exsudato peritoneal de camundongos BALB/c). Promastigotas foram também incubadas com a ZnTnHex-2-PyP⁴⁺ (5 ou 10 μM) durante 10 min, seguido de irradiação por 2 ou 5 min. O dano celular foi avaliado através da contagem celular, marcação com IP e Rh 123, além da microscopia de contraste de fase. Os resultados demonstraram que o tratamento fotodinâmico associado a zincoporfirinas foi capaz de induzir dano celular em mais de 90% das promastigotas, sendo um maior número de células afetadas quando o fotossensibilizador ZnTnHex-2-PyP⁴⁺ foi utilizado. O tratamento com a ZnTnHex-2-PyP⁴⁺ + luz apresentou toxicidade superior a induzida pela ZnTE-2-PyP⁴⁺ + luz frente às células de mamífero. A marcação com IP sugere que ambas as zincoporfirinas + luz provocam a perda da integridade da membrana celular do parasita. Quanto ao potencial de membrana mitocondrial, observou-se hiperpolarização nas células tratadas com ZnTE-2-PyP⁴⁺+ luz e despolarização acentuada nas células tratadas com ZnTnHex-2-PyP⁴⁺ + luz. As avaliações ultraestruturais de promastigotas após o tratamento fotodinâmico associado a ZnTE-2-PyP⁴⁺indicaram danos como perda de material citoplasmático, surgimento de vacúolos, enrugamento da membrana plasmática e redução do volume celular. O número de amastigotas no interior dos macrófagos foi reduzido em cerca de 40% após a aplicação da ZnTE-2-PyP⁴⁺+ luz. Os resultados obtidos permitem apontar a TFD associada a zincoporfirinas como uma alternativa promissora para terapia da Leishmaniose Cutânea. |
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